1992年,馬敬涵就讀于遼寧省藝術(shù)學(xué)校,學(xué)習(xí)京劇表演,專攻老生,武生行當(dāng)。在校期間,他參加匯報(bào)演出《趙氏孤兒》《空城計(jì)》《烏盆記》等三十余部劇目。1998年,馬敬涵就職于丹東市話劇團(tuán),期間出演了《白鷺謠》《小孩遇大禍》《夏天的記憶》等話劇。2002年9月,考入北京電影學(xué)院表演系本科班。在校期間,與劉亦菲,江一燕等同班同學(xué)一起匯報(bào)演出《俄羅斯人》《百花深處》《夜半歌聲》等劇目。
2005年,出演個(gè)人首部電視劇《散打王》,在劇中飾演文龍,從而正式進(jìn)入演藝圈。2006年,與李冰冰,黃海冰,陳龍合作主演古裝勵(lì)志劇《劍俠奇緣》,在劇中飾演曹矜；同年,與宋丹丹合作主演青春校園劇《談?wù)勑膽賾賽邸?在劇中飾演男主角劉得華的同學(xué)羅鳴。2008年,與溫兆倫,王思懿合作主演古裝情感劇《大宋才子黃庭堅(jiān)》,在劇中飾演米芾；同年,與戚跡,祝希娟,陶澤如合作主演古裝歷史劇《根在中原》,在劇中一人分飾二角,飾演了海盜王,陳佑甫。2009年,與胡歌,白冰,張世合作主演古裝穿越劇《神話》,在劇中飾演儒雅智慧且德才兼具的秦始皇大太子扶蘇；同年,與馬雅舒,陳思成,吳卓羲合作主演民國愛情劇《大丫鬟》,在劇中飾演城府頗深且內(nèi)心陰暗的蕭鴻羽。2010年,與楊冪,馮紹峰,何晟銘合作主演清宮穿越劇《宮鎖心玉》,在劇中飾演九阿哥愛新覺羅·胤禟；同年,與黃海冰,李彩樺,陳德容合作主演古裝歷史探險(xiǎn)劇《怒海雄心》,在劇中飾演亦正亦邪且智勇雙全的臥底凌非凡；同年,與張庭,李小璐,明道合作主演唐宮懸疑劇《美人天下》,在劇中飾演唐高宗李治的貼身太監(jiān)元修。2011年,與杜淳,董潔,張嘉倪合作主演古裝愛情劇《美人如畫》,在劇中飾演精通刺繡的寧王；同年,與杜淳,何晟銘,袁姍姍合作主演清宮穿越劇《宮鎖珠簾》,在劇中飾演皇后的弟弟札蘭泰；同年,與趙麗穎,戚跡,韓棟合作主演古裝愛情勵(lì)志劇《錯(cuò)點(diǎn)鴛鴦》,在劇中飾演慕容復(fù)；同年,憑借電視劇《宮鎖心玉》獲得“優(yōu)酷影視指數(shù)開年盛典”最具潛力男新人獎(jiǎng)。2012年,與何晟銘,張逗逗,金晨合作主演諜戰(zhàn)劇《桐柏英雄》,在劇中飾演軍人褚一虎；同年,與何晟銘,高洋,蔣夢婕合作主演古裝情感劇《功夫乾隆》,在劇中飾演出身神秘且俠肝義膽的葉蒼云；同年,與劉濤,黃覺,張國慶合作主演情感懸疑劇《迷局1927》,在劇中飾演善良仗義,樂于助人但叛逆,孤傲的水家二少爺水志云；同年,與余少群,何杜娟合作主演情愛懸疑驚悚電影《地下室驚魂》,在片中飾演狂放不羈的問題青年張鳴。2013年,與楊冪,李易峰,喬振宇合作主演古裝魔幻武俠劇《古劍奇譚》,在劇中飾演板藍(lán)根修煉成人的洛云平；同年,與雷佳音,程琤合作主演抗戰(zhàn)劇《飛哥大英雄》,在劇中飾演國民黨特戰(zhàn)隊(duì)頭號殺手凱文；同年,與張翰,楊洋,何晟銘合作主演古裝武俠劇《少年四大名捕》,在劇中飾演四大惡人之一的屠晚；同年,主演由李錦航執(zhí)導(dǎo)的電影《詭替身》飾演男一威廉。2014年,與聶遠(yuǎn),金晨合作主演革命戰(zhàn)爭劇《掩不住的陽光》,在劇中飾演李銘文；同年,與釋小龍,蔡文靜,陳雅麗合作主演近代傳奇劇《無敵鐵橋三》,在劇中飾演那桂寶。2015年,與何晟銘,孫堅(jiān),jessicacambensy合作主演戰(zhàn)爭傳奇劇《怒海紅塵》,在劇中飾演命運(yùn)多舛的顧云禮；同年,在抗戰(zhàn)劇《熱血》中飾演韓燁。2016年,與陳赫,金晨,尹正合作主演古裝喜劇《極品家丁》,在劇中飾演皇帝趙元羽。2018年,在古裝宮廷權(quán)謀劇《獨(dú)孤天下》中飾演元修；同年,主演民國傳奇劇《人生若如初相見》；同年,在古裝歷史劇《天下長安》中飾演徐世勣。2019年,由胡玫執(zhí)導(dǎo),與富大龍,馬伊琍共同主演的古裝院線電影《進(jìn)京城》,在劇中飾演男一汪潤生,并榮獲“中加國際電影節(jié)最佳男演員”；同年,參演李現(xiàn),李一桐主演的古裝武俠劇《劍王朝》,飾演梁聯(lián)；同年,參演侯明昊,成毅主演的《怒海潛沙&秦嶺神樹》,在劇中飾演王祈；同年,主演由雷金克執(zhí)導(dǎo)的懸疑電影《掘地三尺》,飾演男一何正宇。2020年,主演古裝電影《后羿之逐日之戰(zhàn)》飾演男一后羿。2021年,主演由朱少杰執(zhí)導(dǎo)的抗戰(zhàn)劇《三道塬》,在劇中飾演男一共產(chǎn)黨員蔡葆梓。2022年,參演電視劇《迷霧之境》；4月6日,參演由高希希,趙立軍執(zhí)導(dǎo),與馮紹峰,陳寶國共同主演的歷史劇《山河月明》播出,在劇中飾演忠肝義膽的張玉；同年,出演由郭虎,任海濤執(zhí)導(dǎo),與成毅,曾舜晞,肖順堯,陳都靈主演的古裝武俠懸疑劇《蓮花樓》,飾演玉樓春；7月20日,參演由郭虎,任海濤執(zhí)導(dǎo),楊紫,成毅聯(lián)袂主演的電視劇《沉香如屑》在優(yōu)酷播出,在劇中飾演泠疆；8月1日,由潘軍執(zhí)導(dǎo),與何冰,張國強(qiáng)共同主演的現(xiàn)實(shí)題材電視劇《分界線》在江蘇衛(wèi)視,愛奇藝,優(yōu)酷,騰訊視頻開播,在劇中飾演馮軒；同年,主演由劉斌執(zhí)導(dǎo)的古裝懸疑系列電影《大明仵作》,飾演趙鵬；12月26日,參演由尹濤執(zhí)導(dǎo),李宏毅領(lǐng)銜主演的古裝武俠劇電視劇《少年歌行》播出,在劇中飾演白發(fā)仙；同年,參演由董亞春執(zhí)導(dǎo),佟瑞欣,馬曉偉主演的革命歷史劇《天下同心》,飾演向北。2023年,參演由尹濤執(zhí)導(dǎo),白敬亭,宋軼領(lǐng)銜主演的古裝成長愛情劇《長風(fēng)渡》,飾演劉春；同年參演由鄭曉龍,安戰(zhàn)軍執(zhí)導(dǎo),羅晉,馬思純領(lǐng)銜主演的抗戰(zhàn)劇《偵察英雄》。7月23日,主演的電視劇《蓮花樓》播出。馬敬涵光影寫真馬敬涵紳士時(shí)尚寫真馬敬涵時(shí)尚寫真合輯馬敬涵叢林寫真馬敬涵休閑寫真馬敬涵生活寫真馬敬涵童趣寫真中加國際電影節(jié)《大明仵作》飾趙鵬《獨(dú)孤天下》馬敬涵飾元修《熱血》馬敬涵飾韓燁《人生若如初相見》馬敬涵飾易連怡《大丫鬟》馬文龍飾蕭鴻羽《宮鎖心玉》馬文龍飾九阿哥胤禟《美人天下》馬文龍飾元修《神話》馬文龍飾扶蘇公子
馬敬涵的演技精湛,扎實(shí),他的可塑性極強(qiáng)。馬敬涵對每一個(gè)角色都刻畫得入木三分,深入人心。馬敬涵擁有帥氣的外形,他都市感十足,眼神中帶點(diǎn)壞壞的樣子,極具迷人魅力。